Tolentino è sede del Museo della Caricatura e dell'Umorismo, che promuove la Biennale dell'Umorismo nell'Arte, manifestazione internazionale a cui partecipano artisti e vignettisti satirici da tutto il mondo; centro di grande interesse religioso ed artistico per la Basilica di San Nicola da Tolentino con annesso convento agostiniano e biblioteca Laurenziana. Vi sono anche un Museo Napoleonico e una seconda biblioteca, la biblioteca Filelfica comunale. Tolentino possiede anche un pregevole teatro storico,sede della prestigiosa Compagnia della Rancia diretta dal regista Saverio Marconi, il Teatro Nicola Vaccaj, intitolato al musicista e compositore tolentinate Nicola Vaccaj, colpito il 29 luglio 2008 da un incendio in occasione di lavori di ristrutturazione.

Il Palazzo Sangallo ospita, inoltre, la Scuola Comunale di Recitazione, "Centro Teatrale Sangallo", fondata e diretta da Saverio Marconi.

Presso il Castello della Rancia ha sede il Museo civico archologico "Aristide Gentiloni Silverj", che conserva le testimonianze preistoriche, picene e romane del territorio.

A 15 km dal centro, l'Abbazia di Chiaravalle di Fiastra, fondata dai monaci cistercensi nel XII secolo.

Ogni anno viene organizzato in città il Festival di musica corale "Città di Tolentino" al quale partecipano i migliori cori italiani e stranieri.